產(chǎn)品名稱(chēng)：Beyotime 活性氧檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)： S0033S

英文名稱(chēng)：Reactive Oxygen Species Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：>100次

產(chǎn)品介紹：

活性氧檢測(cè)試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit，也稱(chēng)ROS Assay Kit)是一種利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒(méi)有熒光，可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無(wú)熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。

本試劑盒提供了活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑Rosup，以便于活性氧的檢測(cè)。Rosup是一種混合物(compound mixture),濃度為50mg/ml。

本試劑盒本底低，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便。

本試劑盒S0033S包裝可以測(cè)定100-500個(gè)樣品，S0033M包裝可以測(cè)定500-2500個(gè)樣品。

產(chǎn)品使用說(shuō)明：

1. 裝載探針

對(duì)于刺激時(shí)間較短(通常為2小時(shí)以?xún)?nèi))的細(xì)胞，先裝載探針，后用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞。對(duì)于細(xì)胞刺激時(shí)間較長(zhǎng)(通常為6小時(shí)以上)的細(xì)胞，先用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞，后裝載探針。

原位裝載探針：本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細(xì)胞。按照1:1000用無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10微摩爾/升。去除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入適當(dāng)體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細(xì)胞為宜，通常對(duì)于六孔板的一個(gè)孔加入稀釋好的DCFH-DA不少于1毫升。37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次，以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的DCFH-DA。通常活性氧陽(yáng)性對(duì)照在刺激細(xì)胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。

收集細(xì)胞后裝載探針：按照1:1000用無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10微摩爾/升。細(xì)胞收集后懸浮于稀釋好的DCFH-DA中，細(xì)胞濃度為一百萬(wàn)至二千萬(wàn)/毫升，37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。每隔3-5分鐘顛倒混勻一下，使探針和細(xì)胞充分接觸。用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次，以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的DCFH-DA。直接用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞，或把細(xì)胞等分成若干份后刺激細(xì)胞。通常活性氧陽(yáng)性對(duì)照在刺激細(xì)胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。

說(shuō)明：僅在陽(yáng)性對(duì)照孔中加入Rosup作為陽(yáng)性對(duì)照，其余孔不必加入Rosup。

2. 檢測(cè)

對(duì)于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察，或收集細(xì)胞后用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。對(duì)于收集細(xì)胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)，用激光共聚焦顯微鏡直接觀察也可以。

3. 參數(shù)設(shè)置

使用488nm激發(fā)波長(zhǎng)，525nm發(fā)射波長(zhǎng)，實(shí)時(shí)或逐時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)刺激前后熒光的強(qiáng)弱。DCF的熒光光譜和FITC非常相似，可以用FITC的參數(shù)設(shè)置檢測(cè)DCF。

產(chǎn)品組分：

S0033S-1DCFH-DA(10mM)0.1ml

S0033S-2活性氧陽(yáng)性對(duì)照(Rosup, 50mg/ml)1ml

說(shuō)明書(shū)1份

儲(chǔ)存與運(yùn)輸：

-20℃保存，一年有效。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

品牌             貨號(hào)                   名稱(chēng)                                       規(guī)格

Beyotime  P0131-5ml   抗熒光淬滅封片液(含DAPI)5ml   5ml

Beyotime  P0131-25ml   抗熒光淬滅封片液(含DAPI)25ml 25ml

產(chǎn)品名稱(chēng)：Beyotime 活性氧檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)： S0033S

關(guān)于公司：

Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來(lái)專(zhuān)注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司，為                    特新“小巨人"企業(yè)，并進(jìn)一步入選第二批第一年建議支持的專(zhuān)精特新“小巨人"企業(yè)， 也是G60科創(chuàng)走廊一類(lèi)重點(diǎn)扶持企業(yè)和上海市專(zhuān)精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省優(yōu)良企業(yè)，南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。

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